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具有3 x 7孔的可灌注通道µ-Slide，用于長期球體培養(yǎng)和高端顯微鏡觀察

非常適合在Bioinert表面上長期培養(yǎng)和灌注3D球體或類器官

靈活的灌注準備：球體可以直接在孔中轉(zhuǎn)移或產(chǎn)生

出色的光學(xué)質(zhì)量成像室，用于高分辨率顯微鏡成像

應(yīng)用領(lǐng)域：
●三維細胞聚集體（例如球體和類器官）的培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡
●與ibidi Pump System或任何其他帶Luer連接器的泵設(shè)備一起使用
●在長期培養(yǎng)過程中灌注球體以提供新鮮的培養(yǎng)基，并獲得球體的生長動力學(xué)
●直接在孔中產(chǎn)生球體
●球體研究以用于下游處理（例如，免疫熒光，組織學(xué)和生化測定）
●細胞單層（貼壁細胞），懸浮細胞或共培養(yǎng)的灌注
●具有上下游代謝功能的單片器官設(shè)置
●活細胞成像和3D細胞聚集的顯微鏡檢查
●活細胞和固定細胞以及細胞聚集的免疫熒光染色和高分辨率熒光顯微鏡

技術(shù)特征：
●優(yōu)化的球體/類器官培養(yǎng)和顯微鏡成像孔設(shè)計
●一張載玻片*多可分析21個樣品
●灌注可用于3D細胞聚集體培養(yǎng)過程中的*佳營養(yǎng)供應(yīng)
●開放式孔格式可輕松進行樣品制備-用蓋玻片輕松封閉孔以適用于流體培養(yǎng)
●通道創(chuàng)建孔的簡單流體連接
●魯爾接頭使泵連接變得容易（例如，與ibidi泵系統(tǒng)連接）
●提供三種表面：
●生物惰性的表面完全鈍化，無細胞粘附
●無涂層，可*大程度地減少細胞粘附和懸浮細胞
●ibiTreat（經(jīng)組織培養(yǎng)處理）可實現(xiàn)*佳細胞粘附
●可以通過ibidi Polymer Coverslip底部使用高分辨率熒光顯微鏡觀察樣品
●與染色和固色液兼容
●與DIC蓋一起使用時兼容微分干涉對比（DIC）顯微鏡
●由完全生物相容的材料制成
 

µ-Slide球體灌注培養(yǎng)原理：

µ-Slide球體灌注是用于培養(yǎng)自由漂浮的3D聚集體的專用流動室。它由3 x 7平底孔組成，這些孔通過上方的通道連接。每個孔形成自己的壁，在此培養(yǎng)標本。

通過通道進行灌注時，新鮮培養(yǎng)基會持續(xù)擴散到樣本中。這樣可確保在整個實驗過程中獲得*佳的營養(yǎng)和氧氣擴散，而樣品不會受到明顯的剪切力。

該設(shè)置可確保實現(xiàn)*大的生存能力，但對球體，類器官或組織的剪切應(yīng)力小。
 

此處顯示的是µ-Slide橢球體灌注的單孔中的計算流體動力學(xué)（CFD）模擬。 針對底部壁fluid中的標本優(yōu)化了每個孔的流體特性。請注意，剪切力在上部孔區(qū)占主導(dǎo)地位，而生態(tài)位受到保護。

µ-Slide球體灌注載玻片是一個薄的ibidi聚合物蓋玻片底部，該底蓋具有*高的光學(xué)質(zhì)量（與玻璃相比），非常適合高分辨率顯微鏡檢查。與油浸顯微鏡和熒光成像的兼容，使µ-Slide球體灌注成為理想的球體成像室。
 

實驗工作流程

µ-Slide球體灌注是一項革命性的技術(shù)，可為球體，類器官或組織創(chuàng)造理想的條件。它還允許它們同時培養(yǎng)和成像。

優(yōu)點：
●*佳營養(yǎng)和氣體擴散
●減少細胞凋亡和壞死
●增大球體尺寸和壽命
●長期培養(yǎng)具有出色的生存力和增殖能力
●成熟度提高

播種預(yù)成型的球體

通過簡單的工作流程，可以使用移液器輕松地將現(xiàn)有3D細胞聚集體放入孔中。關(guān)閉孔后，用培養(yǎng)基填充通道，并使用ibidi Pump System或任何其他細胞培養(yǎng)泵開始灌注。可以使用所有常用步驟和方法（例如，懸滴，液體覆蓋，ULA平板或生物反應(yīng)器）生成球體。µ-Slide球體灌注本身不需要任何嵌入的基底，支架或支撐結(jié)構(gòu)。

孔內(nèi)球體的形成

或者，可以在帶有Bioinert表面的µ-Slide球狀體灌注孔內(nèi)直接生成球狀體。這種自組織過程是一種簡單且省時的方法，可在每個單孔中生成均質(zhì)的球體。
 

三維細胞聚集體可以很容易地回收用于下游應(yīng)用，例如組織學(xué)，蛋白質(zhì)譜分析和進一步培養(yǎng)。

µ-Slide球體灌注的應(yīng)用

µ-Slide球體灌注是一種易于使用的微流生物反應(yīng)器，適用于多細胞3D聚集體的多種應(yīng)用。可選擇地，單個細胞在附著到孔底時可用作懸浮培養(yǎng)物或用作細胞單層。此外，可以將多種細胞類型組合在一個孔中，以創(chuàng)建長期的共培養(yǎng)系統(tǒng)。µ-Slide球體灌注的革命性技術(shù)提供了一種高效且可重現(xiàn)的方法，可以同時對標本進行生長和成像。

應(yīng)用實例

灌注培養(yǎng)時高度改善的球狀體生長速率

L929成纖維細胞在µ-Slide球狀體灌注中顯示出球狀體，Bioinert，第1至14天，接種濃度為5 x 10 5單細胞/ ml。左：無灌注，第二天換培養(yǎng)基。右：使用ibidi泵系統(tǒng)灌注，0.75毫升/分鐘。相差顯微鏡，10倍物鏡，孔直徑800 µm。

貼壁細胞熒光成像
 

接種后2小時固定在µ-Slide球形灌注液ibiTreat中的L929成纖維細胞的熒光成像。綠色：F-肌動蛋白（phalloidin）；藍色：核（DAPI）。寬視野熒光顯微鏡，10倍物鏡。